Cuantificación de lípidos de membrana en mutantes nanahuatzin de Drosophila malanogaster

Propiedades

Título

Cuantificación de lípidos de membrana en mutantes nanahuatzin de Drosophila malanogaster

Autor

Francisco Javier Carmona Aldana

Director de Tesis

Juan Rafael Riesgo Escobar, Ma. de Jesús Duran Avelar

Palabras clave

Lipidos de membrana -- Tesis y disertaciones académicas

Fecha de titulación

2007

Editorial

Universidad Autónoma de Nayarit

Resumen

Este estudio analiza el papel del locus nanahuatzin de Drosophila melanogaster, gen que codifica para una aciltransferasa de lisofosfolípidos (LPAT) expresada en el sistema nervioso y órganos sensoriales (visual y olfativo), en la regulación de la composición de lípidos de membrana y su relación con la neurotransmisión sináptica. Las mutantes de nanahuatzin presentan fallas severas en el procesamiento visual y olfativo debido a una deficiente transmisión sináptica entre las neuronas receptoras y las interneuronas de primer orden. El objetivo principal fue determinar si las mutaciones en nanahuatzin o en genes de fosfolipasa $\text{A}_2$ ($\text{PLA}_2$) causan alteraciones cuantitativas en las proporciones de fosfolípidos de membrana respecto a la cepa silvestre (Oregon-R, ORR) y a líneas revertientes. La extracción y caracterización de lípidos se realizó a partir de homogenados totales de mosca y fracciones microsomales de cepas silvestre, mutantes (nana401, nana1b, nana40, $\text{PLA}_2^{\text{C133}}$, $\text{PLA}_2^{13276}$) y revertientes (nana13, nana36). La separación e identificación lipidica se llevó a cabo mediante cromatografía en capa fina (TLC con incorporación de palmitato tritiado) y cromatografía líquida de alta afinidad (HPLC) para cuantificar fosfatidilcolina (PC), fosfatidiletanolamina (PE), fosfatidilserina (PS), fosfatidilinositol (PI) y esfingomielina (SP). Los resultados obtenidos por TLC mostraron una disminución estadísticamente significativa en el nivel de PE en la mutante nana401 ($28.83\,\%$) en comparación con la cepa silvestre ORR ($49.26\,\%$) y la mutante $\text{PLA}_2^{\text{C133}}$ ($56.70\,\%$) ($p < 0.02$). Las cuantificaciones precisas por HPLC en homogenados totales confirmaron reducciones significativas en la cantidad de PE ($p < 0.05$) en las cepas mutantes para nanahuatzin (nana401 con $12.68\,\mu\text{g}$, nana1b con $12.58\,\mu\text{g}$ y nana40 con $13.42\,\mu\text{g}$) al compararse con la cepa ORR ($47.44\,\mu\text{g}$). Por el contrario, las mutantes para $\text{PLA}_2$ no mostraron cambios significativos en las proporciones globales de lípidos de membrana, sugiriendo que su implicación en la transmisión sináptica ocurre mediante alteraciones locales en la relación lisofosfolípido/fosfolípido o la curvatura membranal más que en el fondo total de lípidos. Se concluye que la aciltransferasa de lisofosfolípidos nanahuatzin ejerce una acción reguladora preferente sobre la proporción de fosfatidiletanolamina (PE) en D. melanogaster, constituyendo un hallazgo clave para comprender su función en la estructura membranal y el tráfico vesicular durante la comunicación neural.

Programa educativo

Químico Farmacobiólogo