Aislamiento, clonación y análisis in silico del gen MSA-2C de babesia bOVIS Y gp45 de babesia bigemina de un aislado del Estado de Nayarit

Propiedades

Título

Aislamiento, clonación y análisis in silico del gen MSA-2C de babesia bOVIS Y gp45 de babesia bigemina de un aislado del Estado de Nayarit

Autor

Fátima Huerta Herrera

Director de Tesis

Juan Joel Mosqueda Gualito, Carlos Alejandro González Morteo

Palabras clave

Ganado vacuno-Enfermedades

Fecha de titulación

2006

Editorial

Universidad Autónoma de Nayarit

Resumen

Esta investigación tuvo como objetivo aislar, clonar y analizar in silico los genes msa-2c de Babesia bovis y gp45 de Babesia bigemina a partir de un aislado de campo obtenido en el estado de Nayarit, México, para determinar el grado de conservación de estos candidatos a antígenos vacunales y de diagnóstico. Se seleccionaron bovinos nativos de una zona endémica en el municipio de Santiago Ixcuintla, los cuales fueron evaluados mediante inmunofluorescencia indirecta y posteriormente esplenectomizados para la obtención y purificación de ADN genómico parasitario. La amplificación de los genes completos se realizó mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), obteniendo productos de 800 pares de bases para msa-2c y de 1056 pares de bases para gp45, los cuales fueron clonados en el vector TOPO® y secuenciados. El análisis de la secuencia de msa-2c mostró una identidad nucleotídica del 91.5% y del 86% a nivel de aminoácidos al compararse con cepas de México y Argentina, con la mayor homología registrada hacia la clona vacunal RAD (97% nucleótidos, 94% aminoácidos). Por su parte, la secuencia del gen gp45 reveló una elevada homología del 98.7% en nucleótidos y del 97.2% a nivel de aminoácidos frente a aislados de referencia, mostrando la mayor similitud con el aislado mexicano Acayucan (99.7% nucleótidos, 99.4% aminoácidos). El alto grado de conservación genética encontrado en ambos genes sugiere la existencia de un impedimento funcional para la variación antigénica, reafirmando el potencial de los productos de los genes msa-2c y gp45 como candidatos viables para su inclusión en vacunas recombinantes y herramientas diagnósticas contra la babesiosis bovina en México.

Programa educativo

Médico Veterinario Zootecnista